ในระยะสั้นปฏิกิริยาการตกตะกอนหมายถึงกระบวนการที่สารสองชนิดขึ้นไปมีปฏิกิริยาในสารละลายเพื่อสร้างอนุภาคของแข็ง (ตกตะกอน) ที่ไม่ละลายในตัวทำละลาย ในการวิจัยทางชีวเคมีปฏิกิริยาการตกตะกอนมักจะใช้ในการตรวจจับปฏิกิริยาระหว่างโปรตีนหรือการดัดแปลงทางเคมีของโปรตีน ตัวอย่างเช่นเมื่อมีการผูกมัดเฉพาะระหว่างโปรตีนสองตัวพวกเขาอาจก่อให้เกิดความซับซ้อนและตกตะกอน ในทำนองเดียวกันการปรับเปลี่ยนสารเคมีของโปรตีน (เช่นฟอสโฟรีเลชั่น, ไกลโคซิเลชั่น ฯลฯ ) อาจเปลี่ยนความสามารถในการละลายและทำให้เกิดการตกตะกอน โดยการสังเกตและวิเคราะห์คุณสมบัติของการตกตะกอนรูปแบบปฏิสัมพันธ์หรือสถานะการดัดแปลงทางเคมีระหว่างโปรตีนสามารถอนุมานได้ดังนั้นจึงเผยให้เห็นการทำงานและกลไกการควบคุมของชีวโมเลกุล
ในการวิเคราะห์ปฏิกิริยาการตกตะกอนการรวบรวม precipitates ที่มีประสิทธิภาพเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการกำหนดมวลต่อมาการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์หรือการวิจัยเชิงโครงสร้าง เมื่อรวบรวม precipitates ท่อหมุนเหวี่ยงแบนแบบดั้งเดิมมักจะมีปัญหาในการกระจายตัวของการตกตะกอนและความยากลำบากในการฟื้นตัวอย่างสมบูรณ์ การออกแบบท่อหมุนเหวี่ยงด้านล่างรูปกรวยแก้ปัญหานี้อย่างชาญฉลาด
ด้านล่างของ ท่อปั่นเหวี่ยงกรวย เป็นรูปกรวย รูปร่างพิเศษนี้ไม่เพียง แต่ปรับการเปลี่ยนแปลงของของเหลวในระหว่างการปั่นแยก แต่ยังช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการรวบรวมของ precipitates อย่างมีนัยสำคัญ ในระหว่างกระบวนการหมุนเหวี่ยงเนื่องจากแรงเหวี่ยงการตกตะกอนจะรวมตัวกันไปที่กึ่งกลางของท่อด้านล่าง การออกแบบด้านล่างรูปกรวยช่วยเร่งกระบวนการนี้ทำให้การตกตะกอนสามารถสะสมได้อย่างกะทัดรัดที่ด้านล่างของหลอดลดการกระจายและการสูญเสีย นอกจากนี้ด้านล่างรูปกรวยยังช่วยให้ใช้เครื่องมือได้ง่ายขึ้นเช่นปิเปตเพื่อรวบรวมการตกตะกอนอย่างแม่นยำหลีกเลี่ยงปัญหาที่การตกตะกอนในหลอดเครื่องหมุนเหวี่ยงแบบแบนล่างแบบดั้งเดิมนั้นยากที่จะกู้คืนได้อย่างสมบูรณ์
การกำหนดมวลเป็นส่วนสำคัญของการวิเคราะห์ปฏิกิริยาการตกตะกอน โดยการวัดมวลของการตกตะกอนจำนวนโปรตีนที่เกี่ยวข้องในปฏิกิริยาสามารถคำนวณได้ทางอ้อมจากนั้นสามารถประเมินความแข็งแรงของปฏิสัมพันธ์หรือระดับการปรับเปลี่ยนทางเคมีระหว่างโปรตีนได้ ความสามารถในการรวบรวมการตกตะกอนที่มีประสิทธิภาพของท่อปั่นเหวี่ยงก้นรูปกรวยเป็นพื้นฐานที่เชื่อถือได้สำหรับการกำหนดมวล
ในกระบวนการกำหนดมวลเป็นสิ่งจำเป็นก่อนอื่นเพื่อให้แน่ใจว่าการรวบรวมที่สมบูรณ์ของการตกตะกอน ท่อปั่นเหวี่ยงก้นรูปกรวยบรรลุเป้าหมายนี้ผ่านการออกแบบรูปกรวยที่เป็นเอกลักษณ์ หลังจากการตกตะกอนที่เก็บรวบรวมได้รับการรักษาอย่างเหมาะสม (เช่นการล้างการอบแห้ง ฯลฯ ) สามารถวัดได้อย่างถูกต้องโดยใช้เครื่องมือวิเคราะห์มวลที่ละเอียดอ่อน (เช่นยอดคงเหลืออิเล็กทรอนิกส์, สเปกโตรมิเตอร์มวล ฯลฯ ) โดยการเปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลงมวลของการตกตะกอนภายใต้เงื่อนไขที่แตกต่างกันการเปลี่ยนแปลงแบบไดนามิกของการปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนโปรตีนหรือการปรับเปลี่ยนทางเคมีสามารถเปิดเผยได้ซึ่งให้เบาะแสสำคัญสำหรับความเข้าใจอย่างลึกซึ้งเกี่ยวกับการทำงานของชีวโมเลกุล
การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์เป็นอีกงานที่สำคัญในการวิจัยทางชีวเคมี เอนไซม์เป็นโปรตีนที่กระตุ้นปฏิกิริยาทางเคมีในสิ่งมีชีวิตและสถานะกิจกรรมของพวกเขาเกี่ยวข้องโดยตรงกับกระบวนการเผาผลาญและการทำงานทางสรีรวิทยาของสิ่งมีชีวิต ปฏิกิริยาการตกตะกอนมักใช้ในการตรวจจับการทำงานร่วมกันระหว่างเอนไซม์และสารตั้งต้นสารยับยั้งหรือปัจจัยด้านกฎระเบียบจากนั้นประเมินสถานะกิจกรรมของเอนไซม์
ในการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ท่อปั่นเหวี่ยงก้นรูปกรวยยังมีบทบาทสำคัญ โดยการรวบรวมการตกตะกอนโดยการหมุนเหวี่ยงคอมเพล็กซ์ของเอนไซม์และโมเลกุลที่มีปฏิสัมพันธ์สามารถได้รับได้อย่างง่ายดาย ต่อจากนั้นกิจกรรมของเอนไซม์ในคอมเพล็กซ์สามารถวิเคราะห์เชิงปริมาณโดยใช้วิธีการทดสอบกิจกรรมของเอนไซม์ (เช่นสเปกโตรโฟโตเมทรี, ฟลูออเรสเซนต์ ฯลฯ ) ความสามารถในการรวบรวมการตกตะกอนที่มีประสิทธิภาพของท่อปั่นเหวี่ยงก้นรูปกรวยช่วยให้มั่นใจได้ถึงความแม่นยำและความน่าเชื่อถือของการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์และให้การสนับสนุนที่แข็งแกร่งสำหรับการเปิดเผยกลไกการควบคุมและการทำงานทางสรีรวิทยาของเอนไซม์
การวิจัยเชิงโครงสร้างเป็นพื้นฐานสำหรับการทำความเข้าใจการทำงานของโปรตีนและกลไกการควบคุม ปฏิกิริยาการตกตะกอนมักจะใช้เพื่อให้ได้โปรตีนคอมเพล็กซ์หรือตัวอย่างโปรตีนที่ปรับเปลี่ยนทางเคมีเพื่อจัดหาวัสดุสำหรับการวิเคราะห์โครงสร้างที่ตามมา หลอดปั่นเหวี่ยงด้านล่างรูปกรวยยังมีบทบาทสำคัญในการวิจัยเชิงโครงสร้าง
โดยการรวบรวมการตกตะกอนโดยการปั่นแยกโปรตีนคอมเพล็กซ์คุณภาพสูงหรือตัวอย่างโปรตีนที่ปรับเปลี่ยนทางเคมีสามารถรับได้ หลังการรักษาที่เหมาะสม (เช่นการทำให้บริสุทธิ์, ความเข้มข้น ฯลฯ ) ตัวอย่างเหล่านี้สามารถใช้สำหรับการวิเคราะห์โครงสร้างความละเอียดสูงโดยใช้เทคนิคชีววิทยาโครงสร้าง (เช่นผลึกรังสีเอกซ์, การสั่นพ้องของแม่เหล็กนิวเคลียร์ ฯลฯ ) ความสามารถในการรวบรวมการตกตะกอนที่มีประสิทธิภาพของท่อปั่นเหวี่ยงก้นรูปกรวยช่วยให้มั่นใจได้ว่าตัวอย่างคุณภาพสูงที่จำเป็นสำหรับการวิจัยเชิงโครงสร้างให้การรับประกันที่แข็งแกร่งสำหรับการเปิดเผยลักษณะโครงสร้างและกลไกการทำงานของโปรตีน
แม้ว่าหลอดปั่นเหวี่ยงด้านล่างรูปกรวยจะแสดงประสิทธิภาพที่ยอดเยี่ยมในการวิเคราะห์ปฏิกิริยาการตกตะกอน แต่ข้อควรระวังในการดำเนินการทดลองมีความสำคัญเท่าเทียมกัน นี่คือแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดที่แนะนำ:
เลือกเงื่อนไขการหมุนเหวี่ยงที่เหมาะสม: ตามลักษณะของการตกตะกอนและวัตถุประสงค์ของการทดลองปรับความเร็วและเวลาการหมุนเหวี่ยงเพื่อให้แน่ใจว่าการรวบรวมตะกอนและหลีกเลี่ยงการสูญเสียโปรตีน
ปรับสภาพปฏิกิริยาการตกตะกอน: โดยการปรับค่า pH ความเข้มข้นของเกลืออุณหภูมิและพารามิเตอร์อื่น ๆ ของระบบปฏิกิริยาปรับสภาพปฏิกิริยาการตกตะกอนเพื่อปรับปรุงความบริสุทธิ์และผลผลิตของการตกตะกอน
รวบรวม precipitates อย่างถูกต้อง: ใช้เครื่องมือเช่นปิเปตเพื่อรวบรวม precipitates อย่างถูกต้องในหลอดปั่นเหวี่ยงด้านล่างรูปกรวยเพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียและการปนเปื้อน
จัดการกับ precipitates อย่างเหมาะสม: ตามความต้องการการทดลองการตกตะกอนที่เก็บรวบรวมได้รับการจัดการอย่างเหมาะสม (เช่นการล้างการทำให้แห้งการทำให้บริสุทธิ์ ฯลฯ ) เพื่อให้แน่ใจว่ามีความแม่นยำและความน่าเชื่อถือของการวิเคราะห์ที่ตามมา
ให้ความสนใจกับความปลอดภัยในการทดลอง: เมื่อจัดการกับการตกตะกอนที่มีสารทางชีวภาพต้องปฏิบัติตามกฎระเบียบด้านความปลอดภัยของห้องปฏิบัติการอย่างเคร่งครัดเพื่อให้แน่ใจว่าความปลอดภัยและสุขภาพของผู้ทดลอง
